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土壤高速冷冻离心机在土壤DNA提取中的应用

更新时间:2022-11-08 点击量:1405
  使用土壤高速冷冻离心机的所有转头都具有转头自锁功效 ,能够轻松装卸 ,同时所有转头都能够高温高压灭菌 ,包管了使用者的清静性。
  
  土壤高速冷冻离心机详细提取土壤DNA的办法:
  
  一、土壤样本预处置惩罚:
  
  1、取500mg土壤样本至研磨管中。
  
  2、加入980µL缓冲液 ,轻柔涡旋混匀。
  
  3、加入120μL裂解液。
  
  4、将研磨管置于研磨仪中 ,40Hz处置惩罚40sec。
  
  5、12000rpm离心5min ,沉淀碎片颗粒。
  
  6、转移上清液至2mL离心管中。加入250μL去卵白液 ,手摇动晃混匀。4℃安排5min。
  
  7、12000rpm离心3min ,之后取未几于900μL上清液 ,转移至2mL离心管中。
  
  8、加入1/3体积的团结液 ,轻柔涡旋混匀。4℃安排5min。
  
  9、12000rpm室温离心1min。转移上清液至5mL离心管中。
  
  10、加入1.5倍体积的缓冲液 ,连忙奏乐混匀。
  
  二、DNA提�。�
  
  1、将DNA吸附柱套入2mL网络管中 ,备用。
  
  2、将预处置惩罚混淆液加入到DNA吸附柱中 ,12,000rpm室温离心1min ,弃掉废液。
  
  3、将DNA吸附柱放接纳集管 ,加入600µL漂洗液 ,12,000rpm室温离心30sec ,弃废液。
  
  4、重复一遍办法3。
  
  5、将DNA吸附柱放接纳集管 ,空柱12,000rpm离心2min ,以除去残留的漂洗液。
  
  6、将DNA吸附柱放入新的清洁1.5mL离心管中 ,在滤膜中央加入30-100µL洗脱液 ,室温安排3min。然后12,000rpm离心1min ,网络滤液即为样本DNA。
  
  7、DNA样品可置于-20℃短期生涯 ,-80℃恒久生涯。

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